学历类试题

（1）雄家蚕的性染色体为ZZ，雌家蚕为ZW。已知幼蚕体色正常基因（T）与油质透明基因（t）是位于Z染色体上的一对等位基因，结天然绿色蚕基因（G）与白色蚕基因（g）是位于常染色体上的一对等位基因，T 对t，G对g为显性。

1）现有一杂交组合：ggZTZT X GGZtW，F1中结天然绿色蚕的雄性个体所占比例为_________， F2中幼蚕体色油质透明且结天然绿色蚕的雄性个体所占比例为_________。

2）雄性蚕产丝多，天然绿色蚕丝销路好。现有下来基因型的雄、雌亲本：GGZtW、GgZtW、ggZtW、GGZTZt、gg ZTZt、GgZtZt，请设计一个杂交组合，利用幼蚕体色油质透明区别的特点，从F1中选择结天然绿色蚕的雄蚕用用生产（用遗传图解和必要的文字表述）。

（2）家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。

1）进行转基因操作前，需用_________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。

2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和_________之间。

3）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_________和_________。

4）利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

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题4图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是

A②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与

B③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上

C④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状

D⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异

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根据基因工程的有关知识，回答下列问题：·

（１）限制性内切酶切割ＤＮＡ分子后产生的片段，其末端类型有　 　　和　 　　。

（２）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是　 　　。

（３）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即　　　　　DNA连接酶和　　　　　　　DNA连接酶。

（４）反转录作用的模板是　 　　，产物是　　 　。若要在体外获得大量反转录产物，常采用　　 　技术。

（５）基因工程中除质粒外，　　　　　和　　　　　　也可作为运载体。

（６）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是　　　　 　　　。

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以绵羊红细胞刺激小鼠脾脏B淋巴细胞，再将后者与小鼠骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞克隆群，由此筛选出的单克隆杂交瘤细胞所产生的抗体

A能识别绵羊整个红细胞

B只识别绵羊红细胞表面的特定分子

C能识别绵羊所有体细胞

D只识别绵羊所有体细胞表面的特定分子

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实验小鼠皮肤细胞培养（非克隆培养）的基本过程如图所示。下列叙述错误的是

A甲过程需要对实验小鼠进行消毒

B乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化 

C丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型

D丁过程得到的细胞具有异质性

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红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO）期间要生产流程如右图

（1）图中①所指的是 技术。

（2）图中②所指的物质是 ，③所指的物质是 。

（3）培养重组CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞严物积累对细胞自身造成危害，应定期更换 。

（4）检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的 细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成

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花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。

用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。

据图回答下列问题：

（1）过程①所需的酶是 。

（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。

（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是 。原生质体经过 再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。

（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和 植株的根尖，通过 、 、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。

（5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1～4进行PCR 扩增的结果。据图判断，再生植株1～4中一定是杂种植株的有 。

（6）对杂种植株进行 接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。

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肺细胞中的let7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导人肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。

请回答：

（1）进行过程①时，需用 酶切开载体以插入let-7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为 。

（2）进行过程e委时，需用 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。

（3）研究发现，如let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取 进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中 (RASmRNA／RAS蛋白质)含最减少引起的。

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在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是

A用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L，滤去析出物

B调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质

C将丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色

D用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同

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下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述，错误的是(　　)

A酵母和菜花均可作为提取DNA的材料

BDNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸馏水

C向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌，可见玻棒上有白色絮状物

DDNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热，冷却后变蓝

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