学历类试题

37．微生物及基因工程：

　　据统计，维生素A缺乏每年导致67万名五岁以下儿童死亡。因此科学家研发了一种通过基因工程使得稻米的食用部分胚乳含有维生素A的前体——胡萝卜素的大米，胡萝卜素在人体内会转化成维生素A，可以缓解人体维生素A缺乏。这种大米因胡萝卜素含量极高因而呈现金黄色，被称为“黄金大米”。

　　黄金大米的制作过程应用了根癌农杆菌介导法进行转基因操作，将能够合成胡萝卜素的酶的基因重组后导入大米的基因组中，具体原理如下图所示。

（1）图14原理中X表示______________________；Y过程表示________________________。

（2）图14中Z过程需要用到的植物激素是________。

　A．生长激素 B．细胞分裂素

　C．赤霉素 D．脱落酸

　E．乙烯 F．吲哚乙酸

　　根癌农杆菌介导法转基因需要利用根癌农杆菌的Ti质粒完成，下图是Ti质粒的具体组成。（T-DNA区大小约17kb）

（3）若将图15质粒用限制酶I与限制酶II进行完全酶切（各个片段大小不一致），并用凝胶电泳分离酶切后的片段，则电泳结果应为上图16（箭头为电泳方向）中的____________。

　　将胡萝卜素基因整合进入Ti质粒时，使用限制酶II进行酶切后进行连接，当整合后的Ti质粒进入农杆菌后，需要对农杆菌进行培养，下表为培养农杆菌用的YEB培养基。

（4）据表分析农杆菌的同化作用类型为____________型。

（5）该培养基从物理形态上分应属于____________培养基。培养基配制完成后需要进行高压蒸汽灭菌，其条件是____________________________________。

（6）由表中可知，该培养基含有下列营养成分中的____________。

A．碳源 　B．氮源

　　 C．无机盐 D．生长因子

（7）为了筛选符合条件的农杆菌，可以在培养基中加入卡那霉素进行筛选。则可以在此培养基中生存的农杆菌类型为________________________________________________。

（8）根癌农杆菌介导法转基因原理如图17所示。当植物受伤时会产生一种信号分子，该信号会作用于农杆菌细胞表面的____________。试分析接受信号分子后农杆菌将T-DNA导入植物细胞的过程：___________________________________________________________________。

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请回答基因工程方面的有关问题：

（1）利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。 图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。

①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为_______。

②在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。

（2）设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。

①第1组：_______； ②第2组：_______。

（3） PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的 功能，这是因为_______。

（4）用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb

即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。

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某实验室做了下图所示的实验研究，下列相关叙述，正确的是

A与纤维母细胞相比，过程①形成的诱导干细胞的全能性较低

B过程②是诱导干细胞的结构和遗传物质发生稳定性差异的过程

C每个Y细胞只产生一种抗体，故过程③不需要选择性培养基进行筛选

D过程④产生的单抗，不需细胞膜上载体蛋白的协助就能释放到细胞外

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请根据以下提供的实验材料，完善生物制剂W对动物不同细胞的分裂具有促进作用的实验思路，并预测实验结果。

实验材料：培养液、正常体细胞、癌细胞、W、胰蛋白酶。

（要求与说明：答题时不考虑加入W后的体积变化等误差。提供的细胞均具有分裂能力，只进行原代培养且培养条件适宜）

（1）实验思路：

①取培养瓶若干个，分组如下：

＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

每组设置若干个重复样品。

②各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，各取其中的几个样品，加入＿＿＿＿，摇匀，在显微镜下用血细胞计数板分别计数并记录细胞数。

③重复②若干次。

④＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（2）预测实验结果（用坐标系和细胞数变化曲线示意图表示）：

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土壤农杆菌能将自身Ti的质粒的T-DNA整合到植物染色体DNA上，诱发植物形成肿瘤。T-DNA中含有植物生长素合成酶基因（S）和细胞分裂素合成酶基因（R）,它们的表达与否能影响相应植物激素的含量，进而调节肿瘤组织的生长与分化。据图分析，下列叙述错误的是

A当细胞分裂素与生长素的比值升高时，诱发肿瘤生芽

B清除肿瘤组织中的土壤农杆菌后，肿瘤不再生长与分化

C图中肿瘤组织可在不含细胞分裂与生长的培养基中生长

D基因通过控制酶的合成控制代谢，进而控制肿瘤组织生长与分化

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下列关于转基因植物的叙述。正确的是( )

A转入到油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传人环境中

B转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因撷宰增加

C动物的生长激素基因转人植物后不能表达

D如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题

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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

（1）一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有 个游离的磷酸基团。

（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。

（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Srna Ⅰ切割，原因是 。

（4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。

（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。

（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。

（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。

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下列关于胚胎工程的叙述，错误的是

A体外受精是指获能的精子和成熟的卵子在相应溶液中受精

B受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植

C早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清

D试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术

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题 2 图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述，正确的是

A①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应 T 淋巴细胞

B②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成

C③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性

D④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群

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毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

（1）过程①中最常用的运载工具是_______，所需要的酶是限制酶和____________。

（2）在过程②中，用________处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5％CO2的气体环境中，CO2的作用是_________。

（3）在过程③中，用_______处理以获取更多的卵（母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行________处理。

（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是_________。在胚胎移植前，通过_______技术可获得较多胚胎。

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